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                      血清使用過程中的常見問題

                      發布時間: 2022-04-20  點擊次數: 130次

                      清使用過程中的常見問題

                      ① 保存血清最好方法是什么?

                      我們建議血清應保存在-5℃至-20℃。但是若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當的無菌容器內,再放回冷凍。反復凍融會對血清的品質造成不良影響。

                      ② 如何解凍血清才不會使產品質量受損?

                      我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。

                      ③ 血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?

                      血清在解凍過程(包括沒有完全解凍)或儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如凝集素、纖維蛋白原和玻連蛋白等)可能會聚集成團,形成絮狀沉淀或外觀混濁;在運輸過程中,由于時間較長,所以往往有少許解凍,因此也可能稍有沉淀,但這些都不影響血清性能。

                      若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。

                      ④ 何謂熱滅活?

                      一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,而補體所參與的反應有:溶細胞,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。

                      ⑤ 有必要作熱滅活嗎?

                      實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱滅活的血清,沉淀物的形成,會顯著增多,這些沉淀物在導致顯微鏡下觀察,像是“小黑點",常常會讓研究者認為血清遭受污染,而把血清放進37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。

                      因此我們建議您,若非必須,您可以不做熱滅活處理血清。這樣,不僅節省您寶貴時間,更確保血清的質量。只在做免疫學研究或培養干細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時才推薦做熱滅活。我公司也有已經熱滅活的血清可供選擇。

                      ⑥ 如何減少沉淀物的產生?

                      我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作:

                      ● 解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時,改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。

                      ● 解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。

                      ● 請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。

                      ● 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,則毋須做此步驟。

                      若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。

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